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分子植物育种
(
网络版
), 2012
年
,
第
10
卷
,
第
1061
-
1066
页
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1061
-
1066
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1063
图
3
蝶化捧瓣
SSH
文库的
cDNA
片段大小分析
注
: M: DL2000 DNA marker; 1~15: cDNA
片段
Figure 3 Analysis of the length of cDNA fragments in lip-like
petals library
Note: M: DL2000 DNA marker; 1~15: cDNA fragments
图
4 ESTs
功能分类图
注
:
其它
:
转化生长蛋白
,
氧化还原酶
,
蛋白折叠
,
细小病
毒
,
组蛋白表达负调节因子等
Figure 4 Functional classifications of all ESTs
Note: Others: Transforming growth protein, oxidoreductase
histone, brugiamalayi, histone transcription regulator and so on
所占比例为
58%
、
GenBank
中未匹配蛋白所占比例
为
18%
、储存蛋白所占比例为
6%
以及其它所占比
例为
13%
。
1.5 MADS
系统进化树分析
用
MEGA
软件对筛选到的上调表达的
MADS
克隆构建系统发育树。从图
5
中可知，代号为
b109
、
b9
的序列与细茎石斛、胡颓子、油菜的
PI
基因归
为一类；代号为
b95
和
b107
的序列与凤仙花
DEF1
和
DEF2
聚为一类；
DEF
和
PI
都属于
B
类基因，
与控制花瓣形成有关。
2
讨论
本试验利用抑制消减杂交技术，从
‘
苍山奇蝶
’
突变捧瓣中分离特异表达的序列，获得
4
个
MADS
基因，聚类分析表明：
4
个
MADS
基因归为
B
亚家族
基因中的
PI
基因和
DEF
基因。
DEF
和
PI
基因为植物花器官发育
B
类基因，控
制植物花瓣的发育，近年来，不同实验室已从多种
兰花组织中分离到多个
B
类基因的平行进化同源
基因
(Pelaz et al., 2000)
。德国学者
(Mondragón-
Palomino and Theissen, 2008)
对已发表的包括兰花
图
5
蝶化捧瓣中上调表达
MADS
基因聚类分析
注
: Dm:
细茎石斛
; Ee:
胡颓子
; Bn:
油菜
; Iy:
凤仙花
; Ii:
遂昌凤仙花
; P:
矮牵牛
; Lf:
台湾百合
; Ps:
罂粟
; Cm:
鹦喙
花
; St:
四翅槐树
; Ha:
向日葵
; Ca1:
小粒咖啡
; Ca2:
辣椒
; Ta:
小麦
; Sa:
虎耳草
; Zm:
玉米
; Ll:
麝香百合
; Ja:
金茄木
; Rf:
毛茛
; Ls:
霉草科
; Cf:
蕙兰
Figure 5 Clustering analysis of up-regulate expression genes in
lip-like petals of peloria flower
Note: Dm:
Dendrobium moniliforme
; Ee:
Elegia elephas;
Bn:
Brassica napus
; Iy:
Impatiens yingjiange
; Ii:
Impatiens irvingii
;
P:
Petunia
; Lf:
Lilium formosanum
; Ps:
Papaver somniferum;
Cm:
Clianthus maximus
; St:
Sophora tetraptera;
Ha:
Helianthus
annuus
; Ca1:
Coffea Arabica
; Ca2:
Capsicum annuum
; Ta:
Triticum aestivum
; Sa:
Saxifraga careyana
; Zm:
Zea mays
; Ll:
Lilium longiflorum
; Ja:
Juanulloa aurantiaca
; Rf: Ranunculus
ficaria; Ls:
Lacandonia schismatic
; Cf:
Cymbidium faberi
在内的所有单子叶植物的
DEF
基因进行了系统进化
及发育方面的分析后，提出了兰科植物花器官属性
决定的分子模型，并将之称为
“
兰花密码
”
，认为兰
花的
DEF
类基因在早期经过两轮复制，形成了四类
基因，第一和第二类
DEF
基因独立控制花瓣状的萼
片形成，第一、第二和第三类
DEF
基因共同控制捧