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分子植物育种
(
网络版
), 2012
,
10
,
1511-1517
Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1511-1517
http://mpb.5th.sophiapublisher.com
1515
7
烟草对照与转基因植株蔗糖诱导前后
GUS
染色情况
: A:
烟草对照
(a);
阳性再生植株
(b); 5%
蔗糖诱导抗性再生植株
(c); B: b
脱去背景色
; C: c
脱去背景色
; D
E
F:
分别为
C
中的染色根、叶、茎
; G
H:
显微镜下观察抗性再生植株根染色
Figure 7 GUS staining of negative tobacco control, transgenic plants and sucrose-inducible transgenic plants
Note: A: Negative control (a); Positive transgenic tobacco(b); Positive transgenic tobacco were treated with 5% sucrose; B: The same
as b; C: The same as c; D
E
F
G
H: GUS staining of roots and leaves of transgenic plants
有时间表达特异性,受储藏蛋白合成时期的相关物
质的调控。
本研究利用
5%
蔗糖诱导转基因植株,
GUS
基因
在烟草各个部位均强烈表达,甘薯中则只在根中出
现蓝色,说明蔗糖诱导了此启动子表达。烟草与甘
薯中的不同表象证实了
SpoA-p
属于蔗糖诱导性的
根特异启动子。
SpoA-p
是一个可诱导性的块根特异启动子,该
启动子可以为植物块根特异表达系统研究提供帮
助。有研究表明
Sporamin
含量与甘薯块根中淀粉含
量呈正相关
(Nakamura et al, 1991)
,本研究小组在淀
粉合成相关基因的克隆及遗传转化有一定的研究
基础,已成功的将
AGPa1
AGPa2
基因导入了甘薯
中并得到了转基因植株,分析表明
AGPase
在甘薯中
提高了活性,得到了超量的表达
(
张聪等
, 2010;
雪莲等
, 2011;
阎文昭等
, 2010,
四川科学技术出版
, pp.99-127)
。因此通过此启动子的研究能使淀粉
合成相关基因在块根中得到特异表达,提高淀粉含
量,探索块根淀粉、储藏蛋白的合成机理中的相互
关系,为选育获得高淀粉新品种奠定基础。
3
材料与方法
3.1
块根储藏蛋白启动子的克隆
川薯
34
为实验材料提取总
DNA
,经电泳检测及
紫外分光光度计分析。设计引物
SpoA-p F
AAGCT-